使用MTT测试细胞增殖的方法
细胞活力是一个与细胞增殖有关的重要指标，许多生物学研究都需要对细胞活力进行检测。MTT是一种广泛应用于细胞学研究中的方法，本文将介绍如何使用MTT来测定细胞活力。
什么是MTT？
MTT（3-[4,5-二甲基-2-噻唑]-2,5-二苯基溴化物）是一种类似于溴化乙酰化邻菲罗啉（BCIP）和硝酸氯苯（NBT）的化学试剂，可以测量细胞活力。它通过蒙特酰化作用与活细胞内的邻苯二酮酰在线粒体中形成深蓝色的甲烷。MTT可以用于细胞活力测定、细胞增殖、细胞毒性和药物筛选等。
如何使用MTT测定细胞活力？
MT测试的原理是将MTT加入培养基中，它会在活细胞里被酶还原，生成可溶于甲醇的紫色深蓝色产物，利用显微镜或酶标仪（ELISA）检测间接确定细胞的数量。测定细胞活力的步骤如下：
- 将MTT加入培养基中：将99%的MTT用磷酸盐缓冲液稀释至1mg/ml，将所需量加入培养基中。按照细胞培养的标准将物品施加到培养皿中。
- 诱导活细胞分泌酶并泳化MTT：加入所需药品、细胞激素等，根据实际情况进行添加和取代。恶性细胞或肿瘤细胞可以加入钙离子离子水平的增加因子，激活肿瘤细胞内外环境的一些因子，并且增加细胞激情。溶酶引起的细胞外胞片会奉献出大片的MTT精准地测量白细胞/正常细胞。乳酸奉献增加会刺激骨髓细胞更加稳定地生长和活力增加，从而对一些体内药物的治疗效果发挥关键作用。
- 甲烷产生：抽取MTT稀释液的小分子保持暗光状态，让试剂充分反应30-40分钟，即可产生甲烷反应物趋势看清楚。
- 分析检查：通过显微镜或光度计测定细胞中的甲烷值，反比准确的细胞活力值，可以精确地测量细胞的活力。把实验数据储存起来，做出相关表格，加入图像。
MTT测试的优点和缺点
优点：MTT测试成本低，配方方便，易于量化细胞活力。MTT检测可用于多种细胞增殖方向的研究，检测结果稳定，再现性好，操作简单快捷，对细胞损伤的敏感性高。
缺点：MTT测试测量结果同时会受到影响因素，如细胞刺激、生长阶段影像拍卖平台，培养条件和试剂稀释的差别可能会引起测量结果的偏差。此外，MTT测试无法区分细胞生存、分化和凋亡，只能较为粗略地估算细胞活力。
总之，MTT测试是一种在细胞培养研究中广泛应用的方法。本文介绍了如何使用MTT测定细胞增殖的方法，同时也指出了MTT测试的优缺点。鉴于MTT测试的操作简单易用，它对于生物学研究和药物筛选研究都具有重要意义。
